Сравнительная жизнеспособность Francisella tularensis subsp. mediasiatica и subsp. holarctica в условиях in vivo и in vitro
Аннотация
Цель работы – сравнение способности к выживанию вирулентных штаммов эндемичных для России голарктического и среднеазиатского подвидов туляремийного микроба в водной среде и в условиях организма животного. Материалы и методы. Использовали 11 вирулентных штаммов различных подвидов из Государственной коллекции «ГКПМ-Оболенск». Для оценки выживаемости бактериальные клетки исследуемых штаммов в концентрации 5·106 КОЕ/мл инкубировали в течение 5 недель в автоклавированной водопроводной воде. Жизнеспособность бактериальных клеток Francisella tularensis определяли непосредственно перед экспериментом и далее еженедельно методом высева на плотную питательную среду. Для сравнения штаммов подвидов holarctica и mediasiatica по выживаемости in vivo смесь штаммов трижды пассировалась через мышей с подсчетом соотношения колоний каждого штамма в селезенке при каждом пассаже. Дифференциацию колоний проводили, оценивая длину VNTR-локуса Ft-M20 методом ПЦР с последующим гель-электрофорезом. Результаты и обсуждение. Подвид mediasiatica показал достоверно меньшую способность к выживанию в воде по сравнению с подвидом holarctica. В то же время анализ результатов высевов после сочетанного заражения мышей штаммами голарктического и среднеазиатского подвидов свидетельствует, что подвид mediasiatica размножается в организме хозяина более эффективно, чем подвид holarctica.