Оценка диагностической значимости кроличьих поликлональных антител к комплексным антигенам внешних мембран и секретируемым стресс-белкам Francisella tularensis

Широкое распространение природных очагов туляремии на территории Российской Федерации обусловливает необходимость создания новых и совершенствования имеющихся методов иммунодиагностики возбудителя. На сегодняшний день актуальной задачей остается поиск антигенов Francisella tularensis, которые смогли бы обеспечить высокую чувствительность и специфичность разрабатываемых на их основе диагностических тест-систем. При этом большие надежды возлагаются на поверхностные структуры клеток туляремийного микроба (ЛПС и белки наружной мембраны) и секретируемые стресс-белки. Цель работы – оценка диагностической значимости кроличьих поликлональных антител к комплексным антигенам внешних мембран и секретируемым стресс-белкам туляремийного микроба. Материалы и методы. В работе использовали вакцинный штамм, его бескапсульный дериват, 6 вирулентных штаммов F. tularensis разных подвидов и биоваров, а также 10 штаммов гетерологичных микроорганизмов. Оценку диагностической значимости полученных кроличьих гипериммунных сывороток проводили с использованием иммуноферментного анализа, иммуноблоттинга, реакции микроагглютинации и непрямой гемагглютинации. В качестве образцов использовали чистые культуры микроорганизмов, суспензии органов лабораторных животных, вакцинированных F. tularensis 15 НИИЭГ (белые мыши) и зараженных F. tularensis 503/840 (морские свинки). Результаты и обсуждение. Получены кроличьи поликлональные антитела к антигенам внешних мембран и секретируемым стресс-белкам F. tularensis. С помощью иммуноблоттинга определена их эпитопная направленность. Показана способность полученных поликлональных антител вступать в реакции со специфическими антигенами F. tularensis разных подвидов в иммунологических тестах. Установлено, что полученные антитела могут использоваться для выявления возбудителя в суспензиях органов вакцинированных и зараженных лабораторных животных. При этом наибольшей диагностической значимостью обладают антитела к сложным антигенам F. tularensis, в состав которых кроме белкового входит углеводный компонент клеток туляремийного микроба. Поликлональные антитела к отдельным секретируемым стресс-белкам (Bfr и GroEL/GroES) специфичны, но не позволяют выявить возбудитель при его низкой концентрации в образце, что может быть связано с разной интенсивностью экспрессии этих антигенов в процессе жизнедеятельности микроорганизма.