Авирулентный пробиотический штамм Escherichia coli , продуцирующий B-субъединицу холерного токсина: получение, стабильность наследования и экспрессия клонированного гена ctxB

<div>Цель исследования – получение продуцента B-субъединицы холерного токсина на основе авирулентного пробиотического штамма Escherichia coli M-17, изучение его молекулярно-генетических и иммуногенных свойств.Материалы и методы. Использовали генетически маркированный штамм E. coli KS164 thy polA (pIEM3), содержащий рекомбинантную плазмиду с клонированным геном ctxB, кодирующим B-субъединицу холерного токсина, и авирулентный штамм Е. coli M-17, применяемый для производства колисодержащих пробиотиков. Анализ штаммов проводили различными методами: молекулярно-генетическими, биохимическими и иммунологическими.Результаты и обсуждение. При введении методом конъюгации в клетки штамма Е. coli M-17 рекомбинантной коинтегратной плазмиды pIEM3(KmRTcR) с клонированным геном ctxB получены трансконъюганты KmRTcR с высоким уровнем продукции секретируемой B-субъединицы холерного токсина (10 мкг/мл), один из которых (КМ147) взят в качестве штамма-продуцента этого протективного антигена. Показано, что сконструированный штамм Е. coli KM147(pIEM3) KmRTcR стабильно наследует клонированный ген ctxB в составе рекомбинантной плазмиды, способен к образованию антитоксических антител у иммунизированных животных и безопасен для модельных животных. Совокупность этих свойств определяет перспективность его дальнейшего использования при конструировании профилактических и диагностических холерных препаратов.</div>

Проблемы особо опасных инфекций

Escherichia coli

рекомбинантная плазмида

клонированный ген В-субъединицы холерного токсина

авирулентность

иммуногенность

Цель исследования – получение продуцента B-субъединицы холерного токсина на основе авирулентного пробиотического штамма Escherichia coli M-17, изучение его молекулярно-гене...

Авторы

Чеховская Г.В.

Крепостнова И.М.

Рыбальченко Д.А.

Щелканова Е.Ю.

Смирнова Н.И.

Рекомендуем изучить