Создание и свойства штамма Francisella tularensis 15 НИИЭГ без гена sodC

Цель исследования – создание и изучение иммуногенных свойств штамма Francisella tularensis 15 НИИЭГ без гена sodC, кодирующего CuZn-зависимую супероксиддисмутазу. Материалы и методы. Делецию гена sodC из хромосомы туляремийного микроба проводили методом аллельного обмена с использованием суицидного плазмидного вектора pGM5. Модифицированный фрагмент хромосомы без структурной части гена sodC создавали объединением ампликонов, синтезированных методом ПЦР с помощью двух пар праймеров. Для переноса плазмид в бактерии Escherichia coli и F. tularensis использовали метод электропорации. Для иммунизации и заражения использовали мышей линии BALB/c. Для оценки реактогенности штаммов для мышей определяли средний вес животных в группах. Результаты и обсуждение. Методом аллельного обмена создан штамм F.  tularensis 15ΔsodC, в хромосоме которого отсутствовал фрагмент размером 545 п.о. со структурной частью гена sodC. Данный штамм не отличался по вирулентности и реактогенности от исходного штамма 15 НИИЭГ, но мыши, иммунизированные делетированным вариантом вакцинного штамма, легче переносили экспериментальную инфекцию, вызванную природным штаммом F. tularensis subsp. mediasiatica А-678. Сделано предположение, что удаление гена sodC может улучшить иммуногенные свойства штамма туляремийного микроба при целенаправленном конструировании перспективного кандидата для создания современной туляремийной вакцины со сниженной реактогенностью.