Длительное сохранение Yersinia pestis в ассоциации с Acanthamoeba castellanii в эксперименте

Цель исследования – выявление возможности длительного выживания и сохранения свойств Yersinia pestis в ассоциации с почвенными амебами Acanthamoeba castellanii. Материалы и методы. Использовали штаммы возбудителя чумы и акантамеб, выделенные на одном участке Горно-Алтайского высокогорного очага чумы. Систематическую принадлежность простейших определяли путем анализа данных секвенирования фрагмента гена 18S рРНК с последующим выравниванием на последовательности амеб из базы данных NCBI GenBank. Получение флуоресцентного штамма Y. pestis осуществляли методом электропорации с использованием плазмиды pTurboGFP-B. Совместное культивирование проводили в солевом буфере в отсутствие питательных веществ для клеток возбудителя чумы. Определение влияния сокультивирования с простейшими на свойства штамма Y. Pestis выполняли с помощью микробиологических, биологических и молекулярно-генетических методов. Результаты и обсуждение. Установлено сохранение жизнеспособности клеток штамма Y. pestis основного подвида античного биовара филогенетической линии 4.ANT в совместной культуре с клетками амеб в отсутствие дополнительных питательных веществ на протяжении 22 месяцев эксперимента. Сокультивирование с амебами не привело к изменению культурально-морфологических, генетических и вирулентных свойств штамма возбудителя чумы. Полученные данные подтверждают возможность использования Acanthamoeba castellanii чумным микробом для персистенции в почвенных биоценозах и открывают перспективу изучения механизмов сохранения возбудителя чумы в течение длительных межэпизоотических периодов.