Изучение стабильности свойств штаммов Vibrio cholerae – продуцентов активных компонентов холерной химической вакцины

Одним из ключевых требований к штаммам-продуцентам, используемым в производстве иммунобиологических препаратов, является их стабильность, которая заключается в сохранении основных культуральноморфологических, физиологических и продуктивных свойств в ряде генераций. В данной статье предложен комплексный методический подход для проверки стабильности штаммов методами in vitro.Цель исследования – провести комплексный анализ стабильности штаммов – продуцентов активных компонентов холерной химической вакцины при подготовке посевного материала и на этапе культивирования.Материалы и методы. В работе использовали токсигенные штаммы Vibrio сholerae 569В классического биовара серовара Инаба и V. cholerae М -41 классического биовара серовара Огава. Морфологию клеток контролировали методами световой и электронной трансмиссивной микроскопии. С помощью атомно-силовой микроскопии измеряли основные параметры бактериальной клетки. Анализ штаммов на присутствие в хромосоме гена ctxA осуществляли с использованием тест-системы «ГенХол» с электрофоретическим учетом результатов. Полногеномное секвенирование штаммов проводили на платформе Ion Torrent PGM с использованием чипа Ion 318 Chip Kit и набора реагентов Ion PGM Hi-Q View Chef 400 Kit. Для определения специфической активности холерного токсина и О-антигена использовали ДОТ-иммуноанализ с конъюгатом на основе стафилококкового белка А и наночастиц коллоидного золота.Результаты и обсуждение. Микробиологическими, иммунохимическими, молекулярно-генетическими методами и методами микроскопического анализа на всех этапах культивирования подтверждена стабильность основных свойств производственных штаммов V. cholerae – продуцентов активных компонентов холерной химической вакцины и экспериментально обоснована перспективность использования комплексного методического подхода. Адаптация данных методов позволит контролировать стабильность штаммов-продуцентов, оптимизировать условия культивирования и, как следствие, увеличить выход необходимого антигенного компонента вакцины.

Проблемы особо опасных инфекций

i&gt

Vibrio cholerae&lt

/i&gt

холерная химическая вакцина

стабильность штаммов-продуцентов

полногеномное секвенирование

Одним из ключевых требований к штаммам-продуцентам, используемым в производстве иммунобиологических препаратов, является их стабильность, которая заключается в сохранении о...

Изучение стабильности свойств штаммов Vibrio cholerae – продуцентов активных компонентов холерной химической вакцины

Авторы

Дуракова О.С.

Воробьева С.А.

Гаева А.В.

Краснов Я.М.

Кузнецов О.С.

Ерохин П.С.

Громова О.В.

Волох О.А.

Рекомендуем изучить