Качественные показатели экспериментальных бруцеллезных антигенных препаратов, предназначенных для клеточных тестов in vitro

Для разработки наиболее диагностически информативных методик постановки антиген-стимулированных клеточных тестов in vitro необходим тщательный подбор стимулирующего агента (антигена), обладающего достаточным активирующим потенциалом и обеспечивающим специфичность реакции.

Цель работы – определение качественных показателей экспериментальных серий бруцеллезных антигенных препаратов, предназначенных для клеточных тестов in vitro.

Материалы и методы. Для проведения исследований получали антигенные комплексы бруцеллезного микроба – на основе вакцинных штаммов трех эпидемически значимых видов Brucella spp. (B. abortus, B. melitensis, B. suis). Количественное определение белков экспериментальных серий полученных препаратов WsAg и PPBC проводили методом специфической флуориметрии. Исследование белкового состава препаратов проводили методом капиллярного электрофореза. Качественный состав определяли методом ионообменной жидкостной хроматографии с рефрактометрической детекцией.

Результаты и обсуждение. В результате исследований определены физико-химические характеристики, изучены хроматографические профили и состав белковых фракций, а также проведена апробация изготовленных экспериментальных серий бруцеллезных антигенных препаратов. Анализируя охарактеризованный белковый и полисахаридный состав полученных образцов WsAg, можно сделать заключение о невозможности использования препарата WsAg для клеточных тестов, так как экспериментально доказана вероятность проявления неспецифических реакций лимфоцитов in vitro. В свою очередь, комплексный бруцеллезный антигенный препарат PPBC обладает выраженной специфической активностью и специфичностью в условиях in vitro и имеет перспективы использования при разработке методических подходов для лабораторной диагностики бруцеллеза и оценке фактической привитости контингентов риска после вакцинации. Полученные характеристики позволят обеспечить надлежащее качество при производстве разработанного экспериментального препарата PPBC, предназначенного для клеточных тестов in vitro, с учетом современных правил валидации и стандартизации.