Выявление маркеров лихорадки денге методом ДОТ-иммуноанапиза

Цель. Разработка диагностического набора для выявления маркеров лихорадки денге на всех стадиях заболевания. Материалы и методы. в сыворотках крови от пациентов с подозрением на лихорадку денге проводили выявление антигена NS1 и специфических IgM и IgG методом иммуно-хроматографии, методом дот-иммуноанализа, иммуноферментного анализа, с использованием коммерческих тест-систем, а также экспериментальным набором «Денге-спектр». Результаты и обсуждение. разработан диагностический набор для выявления маркеров лихорадки денге, основанный на механизме одновременного дифференциального выявления белка NS1 возбудителя и антител класса IgM и класса IgG с образованием специфических комплексов между маркерами из исследуемого образца и известными иммунореагентами захвата, в определенном порядке дискретно зафиксированными на плотной подложке. Установлено, что эффективное выявление специфических IgG и IgМ к вирусу денге может быть осуществлено по схеме, при которой захват IgG производится на суммарном антигене вируса с детекцией с помощью меченных антител против IgG человека, а выявление IgМ осуществляется захватом на антителах против IgМ человека с детекцией меченным суммарным вирусным антигеном. выявление белка NS1 вируса денге может быть выполнено с использованием подложки с иммобилизованными моноклональными антителами к NS1 и иммунозоля золота, связанного с антителами к NS1. при такой постановке дот-анализа лимит определения рекомбинантного аналога белка NS1 составил 100 нг/мл. сравнительные испытания набора на панели клинических образцов показали хорошее совпадение результатов с данными, полученными с использованием импортных коммерческих тестов. разработанный набор может найти применение для скрининга клинических образцов, как в лабораторных, так и в полевых условиях.