Изучение экспрессии генов целлюлозосинтаз у льна в процессе роста
Abstract
В селекции лубяных культур, направленной на создание высоковолокнистых сортов, важным является выявление закономерностей формирования волокна на молекулярном уровне, определение генотипспецифичности процессов синтеза целлюлозы, изучение эффективности работы генов, отвечающих за синтез целлюлозы на различных этапах онтогенеза растений. Целью работы являлось изучение экспрессии генов целлюлозосинтаз льна. Объектом исследования являлись 8 образцов льна (род Linum), отличающихся по содержанию волокна: 7 сортов Linum usitatissimum L., из которых 5 сортов льна-долгунца, 2 сорта льна масличного, один образец льна крупноцветкового (L. grandiflorum Desf.). Исследуемые сорта выращивали в растильной установке. Пробы растительного материала отбирали на 10-й, 20-й, 30-й, 40-й и 50-й дни после появления всходов. Проводили извлечение РНК, синтез кДНК. Были получены последовательности РНК CesA1, CesA4, CesA6, CesA7 и разработаны ген-специфические праймеры для ПЦР. Экспрессию генов определяли методом полуколичественной RT-PCR, продукты реакции разделяли по размеру с помощью 1,2%-го агарозного геля. На основании полученных данных было установлено наличие фазо- и генотипспецифичности в процессе экспрессии целлюлозосинтаз семейства CesA в стебле льна. Целлюлозосинтазы первичной клеточной стенки льна (CesA1, CesA6) проявляют динамику роста экспрессии до стадии «елочка», а затем экспрессия постепенно снижается к фазе наступления быстрого роста, тогда как целлюлозосинтазы вторичной клеточной стенки (CesA4, CesA7) характеризуются постоянным увеличением экспрессии от первых дней развития проростков до фазы быстрого роста.