Влияние композитного коллагенсодержащего гидрогеля на функциональную активность фибробластов после кислотноиндуцированного повреждения in vitro
Abstract
Хорошо известно, что кислотность микроокружения оказывает значимое влияние на функциональную активность клеток, участвующих в восстановлении ткани. На сегодняшний день пока недостаточно полно исследовано действие биоматериалов, содержащих в своём составе компоненты межклеточного матрикса дермы человека, на фибробласты, находящиеся в условиях ацидоза.
Цель исследования. Оценить влияние композитного гидрогеля, содержащего в своём составе компоненты дермы, на функциональную активность интактных фибробластов и фибробластов с кислотно-индуцированной дисфункцией.
Материалы и методы. Для имитации физико-химических условий острого воспаления фибробласты человека инкубировали в течение часа при 39 °С в закисленной до рН = 6 питательной среде. С использованием методов световой и люминесцентной микроскопии оценивали морфометрические характеристики фибробластов кожи человека. Оценку количества апоптических клеток и индекса пролиферации выполняли с использованием проточной цитофлуориметрии.
Результаты. Установлено, что воздействие на фибробласты кислой среды ингибирует их адгезивные свойства и снижает скорость роста клеток. Внесение гидрогеля в клеточную суспензию с повреждёнными клетками восстанавливает адгезивные свойства и рост клеток. В популяции фибробластов после кислотного воздействия снижается количество живых клеток и увеличивается количество клеток в стадии апоптоза. Культивирование повреждённых фибробластов в присутствии композитного гидрогеля увеличивает количество живых клеток в популяции и снижает количество апоптических клеток. Кислотно-индуцированное повреждение фибробластов снижает индекс пролиферативной активности. Выявлено, что внесение гидрогеля в культуральную среду стимулирует пролиферативную активность как интактных, так и повреждённых фибробластов. Полученные результаты указывают на то, что композитный гидрогель, состоящий из компонентов внеклеточного матрикса, способен восстанавливать функциональную активность фибробластов, повреждённых в результате воздействия кислой среды. Полученные результаты могут быть использованы для создания биоматериалов, повышающих эффективность регенерации кожных покровов при чрезмерно интенсивном остром воспалении.