Особенности везикуляции у вирулентных и авирулентных ЛПС-дефектных штаммов Francisella tularensis различной подвидовой принадлежности

Целью работы явилось сравнительное изучение внеклеточных везикул (OMVs) и их композиционного состава у вирулентных и авирулентных (ЛПС -дефектных) штаммов Fracisella tularensis различной подвидовой принадлежности. Материалы и методы. С помощью трансмиссионной электронной микроскопии изучен процесс везикуляции у бактерий F. tularensis. Полученные препараты OMVs охарактеризованы по композиционному составу иммунологическими методами: реакция нейтрализации антител (РНА т), иммунохроматографический анализ, дот- и иммуноблоттинг. Результаты и обсуждение. Установлено, что все природные вирулентные штаммы, обладающие S-типом липополисахарида (ЛПС ), способны к образованию двух форм везикул: округлых и тубулярных (tubes), специфичных для F. tularensis. У авирулентных ЛПС -дефектных штаммов образование OMVs не зарегистрировано. Выявлено, что везикулы штаммов различных подвидов имеют свои индивидуальные морфологические особенности. Тубулярные структуры среднеазиатского штамма отличались бóльшими размерами по сравнению с голарктическим штаммом. Возможно, именно это определило тот факт, что препараты везикул F. tularensis subsp. mediasiatica, полученные с использованием фильтров с диаметром пор 0,22 мкм были резко обеднены тубулярными формами. Предложен способ обеззараживания суспензий бактерий с помощью гентамицина, не влияющий на морфологию и антигенную активность везикул. При сравнительном изучении нескольких серий концентрированных препаратов OMVs из разных штаммов туляремийного микроба обнаружено, что все образцы обладали антигенной активностью в реакции преципитации по Оухтерлони, РНА т, ИХ -тесте, дот- и иммуноблоттинге. Исследуемые образцы содержали иммунодоминантный антиген – ЛПС и несколько мажорных антигенактивных белков. Выявлены отличия в композиционном составе иммунодоминантных белков везикул, полученных из штаммов разных подвидов туляремийного микроба.