Моноклональные антитела, способные ингибировать взаимодействие рецептор-связующего домена вируса SARS-CoV-2 с ангиотензинпревращающим рецептором 2 клеток человека

Цель работы – оценить способность моноклональных антител (МКА ) ингибировать взаимодействие рецепторсвязующего домена (RBD) S-белка вируса SARS-CoV-2 вариантов Wuhan-Hu-1 и BQ 1.1 с ангиотензинпревращающим рецептором 2 клеток человека (АСЕ 2). Материалы и методы. В качестве антигенов использованы рекомбинантные RBD вариантов Wuhan-Hu-1 и BQ 1.1. Для наработки мышиных моноклональных антител (мМКА ) гибридомы культивировали in vivo в организме мышей линии BALB/c. Из асцитической жидкости выделяли мМКА очищением сульфатом аммония с последующей очисткой посредством аффинной хроматографии на колонке с сорбентом Protein G Sepharose. Оценку специфической активности мМКА проводили методом иммуноблота с рекомбинантным RBD варианта Wuhan-Hu-1. Для выявления наиболее перспективного мМКА проводили оценку нейтрализующей активности мМКА с помощью метода иммуноферметного анализа посредством иммобилизации RBD на поверхности микропланшета и использования АС E2 в форме конъюгата с пероксидазой хрена. Наработку рекомбинантных антигенов осуществляли в клетках линии ExpiCHO-S (Gibco, США). Результаты и обсуждение. В результате исследования охарактеризованы три мМКА : 5С3, 3F11, 1E6. Все антитела относятся к иммуноглобулинам подкласса G и специфически взаимодействуют с RBD S-белка вируса SARS-CoV-2. Установлено, что наиболее эффективное ингибирование взаимодействия АСЕ 2 и RBD штамма BQ 1.1 наблюдалось у мМКА 3F11 (65 %), а при взаимодействии с RBD штамма Wuhan-Hu-1 – у мМКА 5С3 (91 %). Выявленные характеристики позволяют рассматривать антитела в качестве потенциальных кандидатов для создания терапевтических препаратов на основе антител, что расширяет возможности терапии вирусной инфекции SARS-CoV-2.

Проблемы особо опасных инфекций

SARS-CoV-2

COVID-19

моноклональные антитела

рецептор-связующий домен

ангиотен- зинпревращающий фермент 2

нейтрализующая активность

Цель работы – оценить способность моноклональных антител (МКА ) ингибировать взаимодействие рецепторсвязующего домена (RBD) S-белка вируса SARS-CoV-2 вариантов Wuhan-Hu-1 и...

Моноклональные антитела, способные ингибировать взаимодействие рецептор-связующего домена вируса SARS-CoV-2 с ангиотензинпревращающим рецептором 2 клеток человека

Authors

Иващенко Т.А.

Романенко Я.О.

Карцева А.С.

Силкина М.В.

Марьин М.А.

Хлынцева А.Е.

Зенинская Н.А.

Шемякин И.Г.

Фирстова В.В.

We recommend that you study