Влияние агаровых и биопленочных культур Francisella tularensis на экспрессию генов TLR2 и TLR4 в клетках крови и селезенки экспериментальных животных

Биопленка является формой существования многих бактерий, позволяющая им выживать в неблагоприятных условиях внешней среды. К таким патогенам относятся некоторые штаммы возбудителя туляремии. Иммуногенные свойства штаммов Francisella tularensis, способных к образованию биопленки, изучены недостаточно. Одним из ключевых показателей активации врожденного иммунитета является повышение уровня экспрессии TLRs (Toll-подобные рецепторы). Сравнительный анализ экспрессии генов TLRs в иммунокомпетентных клетках животных, инфицированных биопленочными и агаровыми культурами, позволит оценить их иммуногенный потенциал и адаптивную пластичность, а также дополнит новыми данными имеющиеся сведения о патогенезе туляремии.
Цель работы. Оценить влияние биопленочных и агаровых культур F. tularensis на экспрессию генов TLRs 2 и 4 типов клетками крови и селезенки белых мышей.
Материалы и методы. Исследование проведено на 125 сертифицированных беспородных белых мышах. Забор материала (кровь и селезенка) осуществляли на 1, 2, 3, 7 и 14 сутки. В работе использовали семисуточные биопленочные и двухсуточные агаровые культуры аттенуированного вакцинного штамма F. tularensis 15В линии НИИЭГ и авирулентного F. tularensis И-384. Детекцию молекул РНК и обратную транскрипцию выполняли с помощью коммерческих комплектов реагентов. Концентрацию кДНК TLR2 и TLR4 определяли методом ПЦР в реальном времени с применением специфических праймеров.
Результаты. Сравнительный анализ экспрессии генов TLR2 и TLR4 в ответ на введение биопленочных и агаровых культур F. tularensis выявил статистически значимое увеличение экспрессии генов TLRs в клетках экспериментальных животных, инфицированных биопленочными культурами по сравнению с агаровыми культурами.
Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о значительном влиянии подвидовой принадлежности штамма F. tularensis и условий его культивирования на экспрессию генов TLR2 и TLR4 в клетках крови и селезенки белых мышей при экспериментальной туляремии.