Сравнительный анализ иммуногенной активности чумной вакцины в зависимости от среды выращивания
Abstract
Цель исследования – сравнительный анализ иммуногенной активности вакцины чумной живой, полученной на различных питательных средах.
Материалы и методы. Объект исследования – кровь аутбредных белых мышей, иммунизированных сериями вакцины чумной живой на основе штамма Yersinia pestis EV линии НИИЭГ, изготовленной с использованием экспериментальной и регламентированной питательных сред. Исследована иммуногенная активность вакцин методом проточной цитометрии. Интенсивность антигенреактивности лимфоцитов определяли в клеточных тестах in vitro, анализируя маркер ранней активации CD25+ . Для специфической активации лимфоцитов использовался комплекс водорастворимых антигенов чумного микроба. Для выявления связи наличия протективного противочумного иммунитета с уровнем интенсивности экспрессии маркера ED50 исследуемых серий определяли традиционным методом.
Результаты и обсуждение. Проведен сравнительный анализ иммуногенной активности вакцины чумной живой, полученной на экспериментальной питательной среде с вакциной, выращенной на агаре Хоттингера. При иммунизации животных дозами 4·103 , 2·104 и 1·105 живых микробных клеток (регламентированные дозы) наивысший уровень экспрессии лимфоцитами маркера CD25 достигал максимальной отметки на 14-е сутки с последующим снижением на 21-е сутки после вакцинации. При определении иммуногенности традиционным методом установлена высокая степень прямой связи количества выживших животных с увеличением уровня лимфоцитов, экспрессирующих маркеры ранней активации. При сравнении выявлены общие закономерности: при введении наименьшей иммунизирующей дозы (8·102 ) не наблюдалась активация маркеров раннего иммунитета. При иммунизации бóльшими дозами на 7, 14 и 21-е сутки в крови у биомоделей отмечалось пропорциональное повышение количества CD25-позитивных лимфоцитов после стимуляции специфическим антигеном в условиях in vitro.