Формирование нейтрофильных внеклеточных ловушек при моделировании чумной инфекции у мышей, иммунизированных Yersinia pestis EV НИИЭГ
Abstract
Цель исследования – определить влияние Yersinia pestis EV НИИЭГ на процесс формирования нейтрофильных внеклеточных ловушек in vivo при моделировании чумной инфекции и оценить их вклад в противочумную защиту.
Материалы и методы. В работе использовали мышей линии ВАLB/c, которых подкожно иммунизировали культурой вакцинного штамма Y. pestis EV НИИЭГ. Заражали животных вирулентным штаммом Y. pestis 231 в дозе 20 LD50 (103 КОЕ). Для оценки вклада нейтрофильных внеклеточных ловушек (НВЛ) в антибактериальную защиту применяли экспериментальную модель, основанную на расщеплении НВЛ в брюшной полости мышей нуклеазой. Для подсчета числа НВЛ в перитонеальном экссудате (ПЭ) использовали люминесцентную микроскопию. Фагоцитарную активность клеток ПЭ определяли с помощью проточной цитометрии. Бактериологическим методом регистрировали бактерицидный эффект НВЛ.
Результаты и выводы. У предварительно иммунизированных мышей процесс формирования НВЛ в ответ на повторное введение живых клеток чумного микроба был в 5 раз интенсивнее, чем у интактных животных и сопровождался существенным усилением киллинга клеток Y. pestis в ПЭ. Применение в эксперименте для расщепления образующихся в организме иммунизированных животных НВЛ микрококковой нуклеазы позволило получить доказательства участия НВЛ в обеспечении антиинфекционной защиты от чумной инфекции. Таким образом, установленный факт формирования НВЛ при заражении Y. pestis мышей, иммунизированных вакцинным штаммом Y. pestis EV НИИЭГ, и влияния этого процесса на эффективность защиты от чумы является основанием для дальнейшего уточнения иммунопатогенетической роли нейтрофильных гранулоцитов при чуме.