Оптимизация накопления вируса вакцины при разработке противооспенных препаратов на основе культур клеток

Цель. Оптимизация культивирования вируса вакцины в суспензионной культуре клеток ВНК-21 с целью повышения инфекционной активности вируссодержащей суспензии как основы для получения противооспенных вакцинных препаратов. Материалы и методы. В исследованиях использовали суспензионную культуру перевиваемой линии клеток ВНК-21 72-часового возраста и питательную среду типа МЕМ в соответствии с инструкцией по ее приготовлению. Для инфицирования клеток ВНК-21 использовали вирус вакцины, штамм Б-51. Вирус адаптирован путем трех последовательных пассажей на хорион-алантоисной оболочке развивающихся куриных эмбрионов коммерческой дермовакцины серии 449а в ФГБУ «48 ЦНИИ » Минобороны России. Информация о его генетической характеризации отсутствует. Культивирование и осаждение инфицированных клеток ВНК-21 проводили в ферментере c объемом заполнения 1 л при температуре (36,5±0,5) °С и аэрации воздушной смесью с различным содержанием СО2. Результаты и обсуждение. Повышена интенсивность газового массообмена при одновременном сохранении щадящих гидродинамических условий перемешивания суспензионных культур клеток в ферментере. Увеличена в два раза до (4,48±0,63)·109 кл./л концентрация суспензионной культуры клеток ВНК-21 в конце цикла выращивания. Повышена в 3–5 раз концентрация вируса вакцины с (8,1±0,3) lg БOE/мл до уровня инфекционной активности (8,8±0,3) lg БOE/мл. Удельная множественность инфицирования клеток в пересчете на клетку составила 1–5 БОЕ /кл., а по урожаю вируса – 20–100 БОЕ /кл. Увеличение инфекционной активности вируса в концентрированной суспензии инфицированных клеток ВНК-21 подтверждает перспективность предлагаемых путей совершенствования стадии накопления вируса вакцины при разработке противооспенных препаратов на основе культур клеток.